Меню
Все темы
Поиск:
- Все
- А
- Б
- В
- Г
- Д
- Е
- Ё
- Ж
- З
- И
- Й
- К
- Л
- М
- Н
- О
- П
- Р
- С
- Т
- У
- Ф
- Х
- Ц
- Ч
- Ш
- Щ
- Э
- Ю
- Я
- Все
- A
- B
- C
- D
- E
- F
- G
- H
- I
- J
- K
- L
- M
- N
- O
- P
- Q
- R
- S
- T
- U
- V
- W
- X
- Y
- Z
- FACS-based CRISPR screening
FACS-based CRISPR screening — метод CRISPR-скрининга на основе сортировки клеток с активированной флуоресценцией. Сначала клетки трансдуцируют вектором, чаще всего лентивирусным, который содержит библиотеку гидовых РНК, нацеленных на интересующие исследователей гены. В клеточную суспензию добавляют несущее флуоресцентную метку антитело к специфичной поверхностной молекуле. После этого проводится сортировка клеток с активированной флуоресценцией. Флуоресцентная метка возбуждается под воздействием лазерного луча в приборе-сортере и позволяет отобрать клетки с определенным поверхностным маркером. Из отобранных клеток выделяют геномную ДНК, кассету, кодирующую гидовые РНК, амплифицируют с помощью ПЦР, ампликоны секвенируют, и полученные риды выравнивают на библиотеку референсных гидовых РНК.
