-
Предложен метод диагностики, основанный на профилировании поверхностных белков экзосом
29.08.2019
29.08.2019
Предложен метод диагностики, основанный на профилировании поверхностных белков экзосом
Экзосомы (внеклеточные мембранные везикулы) могут служить важными маркерами заболевания, в частности, поверхностные белки на экзосомах несут информацию об их тканях происхождения. Международная группа под руководством исследователей из Упсалы (Швеция)
описала в Nature Communicationметод профилирования поверхностных белков отдельных экзосом под названием proximity-dependent barcoding assay (PBA). Метод позволяет одновременно выявлять присутствие 38 поверхностных белков на отдельных экзосомах. Авторы используют для штрих-кодирования отдельных экзосом одноцепочечные кластеры ДНК, каждый из которых имеет сотни копий уникального мотива ДНК. Композиция белков на поверхности экзосомы преобразуется в информацию о последовательности ДНК через конъюгаты антитела с ДНК, которая включают в себя случайную последовательность метки. После ПЦР информация о поверхностных белках экзосом, представленная в виде последовательностей ДНК, декодируется c помощью NGS.
Охват тестированием повысился, то есть самостоятельно выполняемые тесты — привлекательная опция для МСМ. Показатели тестирования в группе, получившей тесты, превышали 95%. Однако уровень выявляемости ВИЧ не вырос: по мнению авторов, это может быть связано со снижением заболеваемости в Великобритании. Авторы отмечают, что у большинства проходящих тестирование результат будет отрицательным, поэтому важно сопровождать распространение тестов другими мерами, такими как раздача презервативов, доступ к доконтактной профилактике ВИЧ, поощрение регулярного тестирования на ИППП.
Компания PerkinElmer
объявила о выпуске семи наборов для обнаружения векторов на основе аденоассоциированных вирусов (AAV). Комплекты предназначены для разработчиков генной и клеточной терапии. Они позволяют охарактеризовать создаваемые векторные частицы, что должно упростить рабочий процесса переноса генов в клетки.
Новые наборы, созданные на запатентованной платформе
AlphaLISA, сокращают время на обнаружение вирусов по сравнению со стандартным иммуноферментным анализом. Каждый из семи наборов выявляет определенный серотип: AAV1, AAV2, AAV3B, AAV5, AAV6, AAV8 и AAV9. Новое предложение расширяет портфель PerkinElmer для исследований в области клеточной и генной терапии, который включает антитела, продукты для редактирования и модуляции генов, подсчета клеток и проточной цитометрии.
Вирус оспы обезьян впервые был зарегистрирован в США в мае 2022 года. Когда к августу число новых случаев заражения достигло 400 в день, власти объявили о чрезвычайной ситуации в области общественного здравоохранения.
Компания Quest Diagnostics 7 сентября 2022 года первой получила одобрение FDA для экстренного применения своего теста на оспу обезьян. Тест на основе ПЦР в реальном времени выявляет ДНК оспы обезьян и других ортопоксвирусов, не связанных с натуральной оспой. Ранее для выявления оспы обезьян в США использовался
тест на ортопоксвирусы, разработанный в CDC. Для оценки эффективности нового анализа, по словам представителей FDA, разработчики могут получить остаточные материалы образцов из лабораторий CDC. В дальнейшем появится больше тестов для сравнения.
FDA также составляет руководство по созданию экспресс-тестов на антигены оспы обезьян. Разработчикам рекомендовано связаться с Национальными институтами здравоохранения, объявившими о планах ускорить процессы валидации, получения разрешений и коммерциализации тестов для анализа в местах оказания медицинской помощи и в домашних условиях. Прием заявок по этой программе начался с 7 сентября.
Исследователи получили химерный белок, который состоит из инвертазы и мышиного антитела к человеческим IgG. После этого они сделали тестовые полоски, на которых была закреплена часть S-белка коронавируса. Если обмакнуть полоски в образец крови пациента, то антитела к SARS-CoV-2 свяжутся с S-белком. После этого полоску погружают в раствор с химерным белком, а потом — в раствор сахарозы. И если антитела были в образце, то инвертаза превратит сахарозу в глюкозу, которую можно детектировать глюкометром. Тесты опробовали на нескольких образцах пациентов, эффективность подхода подтвердили сравнением с ELISA.
В первой работе
показано, что в слизистой оболочке кишечника антигены SARS-CoV-2 сохраняются до семи месяцев. Работа была выполнена на 46 пациентах с воспалительным заболеванием кишечника, переболевших COVID-19. Участники исследования заполнили опросник о симптомах. С помощью эндоскопических методов ученые обнаружили нуклеокапсидный белок вируса и CD8+ T-клетки в кишечном эпителии 24 пациентов. Большая часть из них сообщила о продолжающихся симптомах, тогда как пациенты без вирусных антигенов в кишечнике не испытывали последствий ковида.
Авторы второй работы
отслеживали динамику вирусной РНК в образцах стула 113 пациентов, перенесших COVID-19. У 3,8% нуклеиновые кислоты вируса выделялись с фекалиями в течение семи месяцев. При этом признаки нарушений ЖКТ, такие как тошнота, рвота и боль в животе, были связаны с присутствием РНК коронавируса в образцах.
Руководитель американской работы Ами Бхатт, доцент медицины и генетики в Стэнфордском университете,
назвала фрагменты вируса, длительное время сохраняющиеся в кишечнике, «призраками». Вполне возможно, что они вносят вклад в так называемый долгий ковид.