Атаку CAR T-клеток друг на друга предотвратили с помощью редактирования оснований CRISPR-системой

CAR T-терапия хорошо работает при B-клеточных лимфомах, таргетирование же T-клеточных злокачественных новообразований сопряжено с рядом проблем. Популяция T-клеток у пациента при заболевании нарушена, поэтому получить аутологичные CAR T-клетки (то есть сконструированные из T-клеток самого пациента) проблематично. Кроме того, таргетируемый поверхностный белок T-клеток может присутствовать и на самих терапевтических CAR T-клетках, что приведет к их уничтожению (фратрицид CAR T-клеток, см. также на PCR.NEWS).

Исследователи из Великобритании применили многоступенчатую процедуру для получения аллогенных CAR T-клеток (сконструированных на основе T-клеток донора) для лечения Т-клеточного острого лимфобластного лейкоза (T-ОЛЛ). Химерный антигенный рецептор (CAR) нацелен на рецептор CD7, который на высоком уровне экспрессируется в раковых клетках, но присутствует также и на нормальных лимфоцитах. Белок CD7 был удален с поверхности CAR T-клеток путем редактирования оснований (дезаминирования цитозина с использованием CRISPR-системы), чтобы избежать фратрицида. Кроме того, исследователи также удалили с CAR T-клеток TCRαβ, чтобы избежать реакции «трансплантат против хозяина» (РТПХ) — серьезной проблемы, ограничивающей клиническое использование аллогенных CAR T-клеток. Был удален также CD52 — целевая молекула алемтузумаба, который применяется при лимфодеплеции.

Набор участников в фазу 1 клинических испытаний продолжался с 1 апреля 2022 года по 31 мая 2025 года, за это время терапию получили девять детей от 5 до 15 лет, а также две женщины 27 и 38 лет. У всех пациентов был рефрактерный T-ОЛЛ; ранее они получили множественные линии стандартной терапии. Перед введением CAR T-клеток пациенты проходили процедуру лимфодеплеции с использованием химиотерапии. Те пациенты, которые находились в ремиссии через 28 дней после введения CAR T-клеток, проходили процедуру аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток. Перед трансплантацией удаляли все оставшиеся в организме CAR T-клетки.

Все пациенты получили CAR T-клетки, сконструированные из клеток одного и того же донора в рамках одной процедуры модификации клеток. Рецептор CAR7 (CAR, таргетирующий CD7) присутствовал на 59% клеток, остаточная экспрессия TCRαβ составила менее 0,1%, CD7 отсутствовал на более чем 99% клеток, а CD52 — на более чем 98% клеток.

Исследователи сообщают, что синдром высвобождения цитокинов развился у всех пациентов, но тяжесть различалась. Еще одним ожидаемым осложнением после лимфодеплеции была циркуляция вирусов в крови, которая наблюдалась у всех пациентов.

Из 11 пациентов, получивших терапию, 9 были в ремиссии на 28-й день и прошли процедуру аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток. Период наблюдения за пациентами после трансплантации составил от 3 до 36 месяцев, и 7 пациентов в период наблюдения все еще находились в ремиссии. У двух пациентов рецидив был связан с развитием CD7-негативного лейкоза, что является ограничением возможностей терапии.

Это первый случай успешного применения метода редактирования оснований в клинической практике CAR T-терапий.

Цитоплазматический «хвост» из CTLA-4 повышает эффективность CAR-T клеток