Выключение экспрессии EBAG9 повышает эффективность CAR-T терапии

Цитотоксические T-лимфоциты (ЦТЛ) в настоящее время рассматриваются в качестве основы для противораковой терапии. Эти иммунные клетки после обнаружения опухоли выделяют в среду токсичные гранулы и уничтожают раковые клетки. Работа ЦТЛ регулируется несколькими механизмами, в том числе костимуляторными сигналами. Например, активация белка EBAG9 на поверхности лимфоцитов блокирует секрецию активных молекул и мешает уничтожению опухоли. Команда ученых из Германии, Австрии и Японии предложила ингибировать экспрессию EBAG9 и таким способом повысить активность Т-клеток против опухоли.

Сначала ученые проверили свою идею на обычных ЦТЛ, используя модельных мышей. Мыши с нокаутированным геном Ebag9 демонстрировали более активный иммунный ответ на клетки и трансплантаты с чужеродным антигеном по сравнению с мышами дикого типа. Селективный сайленсинг Ebag9 в ЦТЛ с помощью микроРНК привел к увеличению их цитотоксической активности в два раза по сравнению с контролем.

Затем исследователи оценили терапевтический потенциал своей стратегии. Они проверили in vitro, как блокировка экспрессии Ebag9 повлияет на свойства CAR-T клеток. На основе CD8+ T-клеток от здоровых людей ученые сконструировали CAR-T клетки, направленные против множественной миеломы и B-клеточной неходжкинской лимфомы. Выключение экспрессии Ebag9 с помощью микроРНК привело к увеличению продукции цитотоксических белков в два раза в сравнении с контролем. При этом срок истощения иммунного ответа не уменьшился.

Транскриптомный анализ модифицированных CAR-T клеток выявил существенные изменения в генной экспрессии. В частности, снижалась экспрессия генов ингибиторных рецепторов CTLA4, TIGIT и HAVCR2, а также факторов транскрипции, связанных с истощением T-клеток. Это означает, что отключение экспрессии Ebag9 в CAR-T лимфоцитах не уменьшает их приспособленности.

Наконец, ученые продемонстрировали эффективность своего подхода in vivo. Они использовали мышей с ксенотрансплантатом множественной миеломы. Модифицированные CAR-T клетки значительно подавляли рост опухоли и были более эффективны, чем неизменные лимфоциты. Кроме того, новые CAR-T клетки не демонстрировали признаков более активного истощения.

Таким образом, ученые усовершенствовали CAR-T терапию через ингибирование экспрессии Ebag9. По словам одного из руководителей исследования доктора Армина Рема, сотрудника Центра молекулярной медицины им. Макса Дельбрюка (Германия), на данном этапе разработки нужны смелые клиницисты и партнеры для финансирования клинических исследований. Если все пойдет хорошо, новая CAR-T терапия будет доступна пациентам в течение двух лет.