Блокировка SFRP2 усиливает иммунный ответ при трижды негативном РМЖ

В настоящее время растет интерес к поиску новых мишеней для терапии трижды негативного рака молочной железы (ТНРМЖ). Основными стратегиями лечения на сегодняшний день служат «стандартная» химиотерапия и иммунотерапия, однако они эффективны не для всех пациентов.

Группа из Медицинского университета Южной Каролины проанализировала роль белка SFRP2 в качестве одной из потенциальных мишеней. Этот белок служит активатором сигнального пути NFAT, участвует в регуляции ангиогенеза и миграции клеток. Ранее было показано, что его экспрессия повышена в карциномах молочной железы, в том числе в ТНРМЖ, а высокий уровень SFRP2 в крови ассоциирован с более крупными размерами опухоли, метастазами в лимфоузлах и худшей выживаемостью. При этом оставалось не до конца ясным, где именно в опухоли локализуется этот белок.

Чтобы подтвердить наличие SFRP2 в тканях опухоли, ученые исследовали образцы ТНРМЖ с помощью иммуногистохимического анализа и вестерн-блота. Далее они воспользовались методом мультиплексной иммуногистохимии, чтобы уточнить локализацию этого белка — для этого одновременно с SFRP2 визуализировали маркеры макрофагов, T-и B-лимфоцитов и клеток опухоли, имеющих эпителиальное происхождение. 

Выяснилось, что SFRP2 присутствует не только в самих раковых клетках, но и в различных иммунных клетках в опухолевом микроокружении, особенно в опухоль-ассоциированных макрофагах. Кроме того, почти половина клеток, экспрессирующих SFRP2, также несла на поверхности CD38 — гликопротеин с иммуносупрессивными функциями, подавляющий активность CD8+ T-лимфоцитов. Известно, что CD38 участвует в приобретении опухолевыми клетками устойчивости к ингибиторам контрольных точек иммунитета. При этом его фармакологическое ингибирование несет риском осложнений, так как CD38 экспрессируется в норме на различных клетках крови, в том числе на тромбоцитах и нейтрофилах.

Авторы предположили, что блокирование SFRP2 может изменить поведение опухоль-ассоциированных макрофагов и уменьшить иммуносупрессию. Чтобы проверить эту гипотезу, ученые выделили макрофаги из ткани опухоли и обработали их антителом против SFRP2. В ответ на обработку в макрофагах усиливалась выработка интерферона-гамма (IFN-γ) — как на уровне РНК, так и на уровне белка. 

IFN-γ —цитокин, способный стимулировать переход макрофагов к M1-фенотипу, который ассоциирован с противоопухолевой активностью. Отрицательную корреляцию между уровнями экспрессии генов, кодирующих SFRP2 и IFN-γ, подтвердил анализ данных из Атласа ракового генома (TCGA). Кроме того, при совместном культивировании T-лимфоцитов с макрофагами, обработанными антителом к SFRP2, активация T-клеток была усилена по сравнению с контролем. Это свидетельствует об усилении иммунореактивности опухолевого микроокружения.

Эффективность блокировки SFRP2 для лечения ТНРМЖ исследователи проверили на мышиной модели с метастазами в легких. Животным вводили опухолевые клетки одной из двух линий ТНРМЖ. Лечение проводили с помощью моноклонального антитела к SFRP2 в течение 28 или 21 дня. В обоих моделях опухоли введение антитела снижало количество метастатических очагов, стимулировало апоптоз опухолевых клеток и меняло соотношение между M1- и M2-макрофагами в пользу первых (то есть преобладанию макрофагов с противоопухолевыми свойствами над проопухолевыми). Кроме того, у мышей, получавших антитело к SFRP2, возрастала концентрация IFN-γ в крови. В ортотопических моделях человеческих опухолей такая терапия снижала объем опухоли на 61% без выраженных побочных эффектов.

Ученые также уделили внимание лекарственной устойчивости. На линии опухолевых клеток, резистентных к доксорубицину — одному из основных химиотерапевтических агентов для лечения ТНРМЖ, — они показали, что антитело к SFRP2 усиливает апоптоз и в этих клетках.

Дополнительные эксперименты по распределению препарата указывают на селективность его накопления. Меченое антитело детектировалось преимущественно в опухолевой ткани, а не в здоровых органах, что потенциально означает хорошую переносимость.

Полученные результаты демонстрируют, что блокада SFRP2 модулирует опухолевое микроокружение и может стать эффективной стратегией терапии ТНРМЖ, в том числе метастатического. Одно из направлений будущих исследований — комбинация антител против SFRP2 с ингибиторами контрольных точек иммунитета.

Три модификации Fc-фрагмента антитела усилили привлечение иммунных клеток в опухоли молочной железы