T-клетки, нацеленные на неоантигены, прошли фазу 2 КИ при метастатическом колоректальном раке

Неоантигены, возникающие в опухоли при накоплении генетических аномалий, — идеальная мишень для терапии, так как они не встречаются в здоровых тканях. Примерно у 80% пациентов с раками желудочно-кишечного тракта в опухолях выявляются неоантиген-реактивные T-лимфоциты (TIL, tumor-infiltrating lymphocytes). Терапия с помощью TIL показала обнадеживающие результаты при некоторых типах рака. Однако TIL представляют собой высоко дифференцированные клетки, и достижение необходимого для инфузии количества клеток является трудной задачей, сопряженной с их истощением. В новой статье, опубликованной в Nature Medicine, авторы представили результаты фазы 2 КИ аутологичных T-клеток, экспрессирующих неоантиген-реактивные Т-клеточные рецепторы (TCR), для терапии метастатического колоректального рака.

«Взяв естественные Т-клеточные рецепторы, которые присутствуют в очень небольшом количестве клеток, и поместив их в нормальные лимфоциты, которых у нас огромное количество, […] мы можем генерировать столько клеток, борющихся с раком, сколько захотим», — объясняет Стивен Розенберг из Национального института онкологии в Бетесде, один из руководителей исследования.

Для выявления неоантиген-реактивных TCR сначала проводилась резекция метастатического очага. Затем авторы изолировали лимфоциты из опухоли и провели полноэкзомное и транскриптомное секвенирование клеток периферической крови и опухоли для определения соматических мутаций. Затем TIL культивировали вместе с дендритными клетками, содержащими РНК тандемных минигенов или синтетические пептиды с обнаруженными мутациями, и с помощью флуоресцентно-активированного сортинга отбирали те Т-клетки, которые экспрессировали маркеры активации. Последовательности α- и β-цепей TCR отобранных Т-клеток вставляли в ретровирусные векторы, после чего проводили трансдукцию Т-клеток.

В клиническое испытание были включены семь пациентов с метастатическим колоректальным раком. Всем пациентам перед началом терапии проводилась лимфодеплетирующая химиотерапия с помощью циклофосфамида и флударабина. После инфузии T-клеток пациенты получали четыре дозы пембролизумаба каждые три недели и алдеслейкин — препарат рекомбинантного IL-2.

Трое пациентов достигли непродолжительного частичного ответа на терапию, выраженного в регрессии очагов метастазирования в печени, легких и лимфатических узлах. Медиана выживаемости без прогрессирования составила 4,6 месяца. Ответ на терапию зависел от источника неоантиген-реактивных TCR. Пять из семи пациентов получили TCR, выделенные из CD4⁺ T-клеток, только один из которых достиг частичного ответа на терапию. Оба пациента, получавших TCR, выделенные из CD8⁺ Т-клеток, достигли частичного ответа на терапию.

У одного пациента возник синдром высвобождения цитокинов. У всех пациентов развились цитопении, вызванные лимфодеплецией. У одного пациента развился диатез с кровотечением.

После инфузии T-клеток авторы проанализировали персистенцию клеток в крови пациентов. У двух пациентов, опухоли которых не ответили на терапию, не было обнаружено TCR-трансдуцированных клеток на 41 день после инфузии.

В будущем авторы планируют разработать протокол, который позволит получать T-клетки, нацеленные на десять неоантигенов, что сделает этот метод терапии более практичным и потенциально позволит преодолеть гетерогенность опухоли и иммунную резистентность.

Противоопухолевую активность CAR NK-клеток усиливает добавление к рецептору домена CD28