Причиной постковидного мультисистемного воспаления у детей и подростков может быть реактивация вируса Эпштейна — Барр

Большинство детей переносят COVID-19 бессимптомно или в легкой форме, тяжелое течение болезни считается редкостью. Однако даже при бессимптомном заражении спустя 4–8 недель возможно развитие угрожающего жизни состояния — синдрома мультисистемного воспаления у детей и подростков (MIS-C). Для него характерны лихорадка, сыпь и полиорганная недостаточность. Международная группа исследователей выявила возможный механизм развития этого состояния.

В исследовании приняли участие 145 пациентов с MIS-C и 221 пациент без воспалительного синдрома из Германии, Франции, Турции, Чили, Италии и США (в контрольную группу вошли как здоровые дети, как и переболевшие COVID-19). На первом этапе исследователи измеряли уровни цитокинов и хемокинов у пациентов в острой фазе MIS-C и после лечения, через 6 недель после заражения у детей, перенесших инфекцию SARS-CoV-2 без развития MIS-C, у здоровых детей и у детей в острой фазе коронавирусной инфекции.

У детей с MIS-C отмечался повышенный уровень интерлейкина 1 (IL-1), цитокинов 1, 2 и 3 типов и других медиаторов воспаления. Ученые сосредоточили свое внимание на трансформирующем ростовом факторе бета (TGFβ), уровень которого повышается при тяжелом течении COVID-19. У детей с MIS-C уровень TGFβ в плазме крови был схож с уровнем у взрослых с тяжелым течением COVID-19 и превышал уровень у здоровых детей в 3 раза, у детей, зараженных SARS-CoV-2, — в 2,6 раза, а у детей, перенесших коронавирусную инфекцию без развития MIS-C, — в 7 раз. Уровень TGFβ снижался на фоне лечения иммуноглобулинами и метилпреднизолоном. Чтобы доказать функциональную активность TGFβ у пациентов с MIS-C, ученые воздействовали их сывороткой на T-лимфоциты здоровых доноров, что приводило к усилению фосфорилирования белков SMAD2 и SMAD3, являющихся мишенями TGFβ. Интересно, что мутации в генах, кодирующих компоненты сигнального пути TGFβ-SMAD, ассоциированы с повышенным риском развития болезни Кавасаки — состояния, похожего на MIS-C.

На следующем этапе авторы проанализировали мононуклеарные клетки периферической крови участников исследования. У пациентов в MIS-C был обнаружен более высокий уровень пролиферирующих T-лимфоцитов и T-лимфоцитов, активированных посредством T-клеточного рецептора, а также более низкий уровень B-клеток памяти с переключенным классом антител, что свидетельствует о нарушении взаимодействия T- и B-лимфоцитов. Для оценки транскриптомного профиля отсортированных клеток использовался метод РНК-секвенирования единичных клеток. В T-лимфоцитах, B-лимфоцитах и моноцитах из крови пациентов с MIS-C было выявлено усиление экспрессии генов, индуцируемых TGFβ. Кроме того, в моноцитах отмечалась снижение экспрессии генов, задействованных в презентации антигенов. Активация сигнальных путей, связанных с TGFβ, отличает MIS-C от других состояний, ассоциированных с повышенной выработкой провоспалительных цитокинов, например, гриппа.

Инкубируя CD4+ и CD8+ T-лимфоциты пациентов с MIS-C с антигенпрезентирующими клетками и вирусными белками, ученые обратили внимание на снижение реактивации лимфоцитов (определяемой по экспрессии на их поверхности молекул CD69, CD154 и CD137) в ответ на вирусные эпитопы. Аналогичный эффект отмечался при воздействии TGFβ на T-лимфоциты здоровых доноров, а воздействие ингибиторами TGFβ делало его обратимым.

Среди CD4+ и CD8+ T-лимфоцитов пациентов с MIS-C для значительной части клеток было характерно наличие особой формы вариабельного домена бета-цепи TCR, получившей название TCRVβ21.3, причем появление таких клеток приходилось на 1–3 день после начала лечения воспалительного синдрома. Ранее предполагалось, что такие T-лимфоциты реагируют на белки SARS-CoV-2, однако это предположение не подтвердилось. Проанализировав известные данные о специфичности различных форм TCR к вирусным антигенам, ученые пришли к выводу, что TCRVβ21.3+ T-лимфоциты задействованы в ответе на вирус Эпштейна — Барр (EBV). Культивирование TCRVβ21.3+ T-лимфоцитов с EBV-трансформированными B-лимфоцитами подтвердило эту гипотезу — такие клетки демонстрировали повышенную способность к уничтожению зараженных B-лимфоцитов по сравнению с T-лимфоцитами с деплецией TCRVβ21.3.

В ранних исследованиях было показано, что TGFβ оказывает негативное влияние на способность T-лимфоцитов уничтожать B-лимфоциты, зараженные EBV. В новой работе авторы также продемонстрировали, что воздействие TGFβ на B-лимфоциты приводит к литической реактивации вируса, а использование ингибиторов этой молекулы останавливает процесс реактивации в B-клетках, подвергнутых воздействию сыворотки людей с MIS-C или тяжелым течением COVID-19.

Наконец, исследователи обнаружили более высокий уровень антител к EBV в сыворотке пациентов с MIS-C по сравнению с детьми без воспалительного синдрома. Кроме того, ученые подтвердили реактивацию EBV у пациентов с MIS-C, обнаружив мРНК вируса в их плазме крови (чего не отмечалось у здоровых людей и пациентов со слабо выраженными симптомами COVID-19).

Полученные данные свидетельствуют о том, что развитие MIS-C у детей, перенесших COVID-19, является результатом реактивации EBV, вызванной повышением уровня сигнальной молекулы TGFβ. TGFβ негативно влияет на способность T-лимфоцитов сдерживать экспансию вируса. По мнению авторов исследования, ингибиторы TGFβ являются многообещающими препаратами для лечения MIS-C и долгого ковида.

Антитела к вирусу Эпштейна—Барр атакуют белки ЦНС при рассеянном склерозе